hPSC-多巴胺能神經元定向分化-iPSC重編程與定向分化-技術服務-中盛溯源
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hPSC-多巴胺能神經元定向分化


中盛溯源根據客戶需求,提供定制化的hPSC-多巴胺能神經元定向分化服務(例如遺傳疾病患者hPSC-多巴胺前體細胞的定制)。

中盛溯源生物科技有限公司掌握了穩定高效的hPSC-多巴胺前體細胞定向分化技術,適用于從人類多能干細胞(hPSC)定向分化為高純度的多巴胺前體細胞(>90% Lmx1a+/ Foxa2+/ En1+)。

分化獲得的多巴胺能神經前體細胞可應用于神經退行性疾病的科學研究,藥物篩選,以及帕金森疾病模型的細胞移植。

我們以嚴格的質量標準完成制備、鑒定、儲存、包裝、物流等服務環節,滿足客戶的科研要求,保證后續實驗的重復性和可靠性。

具體信息可參考Nuwacell? hPSC-多巴胺前體細胞分化試劑盒和Nuwacell? hPSC-多巴胺前體細胞的說明,并撥打400-888-3920詳細咨詢。


1、分化詳細流程圖


Nuwacell? hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化試劑盒分化流程圖。


2、分化過程中細胞形態圖示


Nuwacell?  hPSC-多巴胺能神經元分化試劑盒分化過程中細胞形態圖示。

圖示為DAY  0啟動分化時的hPSC,DAY  11收獲的mDAP(多巴胺能神經前體細胞),

DAY 12維持培養的mDAP,DAY 45的mDAN(成熟多巴胺能神經元)。標尺:200μm。


3、hPSC來源多巴胺能前體細胞(mDAP)特異性標志物檢測


Nuwacell? hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化試劑盒分化的mDAP細胞熒光圖示。

Lmx1a,Foxa2,En1為mDAP的特異性標志物,免疫熒光染色檢測。標尺:200μm。


Nuwacell?  hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化試劑盒分化的mDAPs特異性標志物檢測。

圖A為RT-qPCR檢測;NKX2.1為間腦標記物、DBX1為中腦前端標志物;LMX1a、FOXA2、EN1、OTX2為中腦標志物,GBX2為后腦標志物。圖B為流式細胞法檢測。


4、hPSC來源成熟多巴胺能神經元(mDAN)特異性標志物和功能檢測


hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經元(mDAN,DAY 40)細胞熒光圖示。

TH和Nurr1共表達為mDAN的特異性標志物,免疫熒光染色檢測。標尺:200μm。


hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經元(mDAN,DAY 45)多巴胺釋放水平檢測結果,多巴胺釋放>2000pg/mL。

對照組為hPSC(正常細胞多巴胺釋放為0-100pg/mL),放射性免疫法檢測。


Nuwacell? hPSC-多巴胺能神經前體細胞分化為成熟的中腦多巴胺能神經元(mDAN,DAY 45)的膜片鉗測試結果。
選取符合形態特征的mDAN進行膜片鉗測試,可檢測到較穩定的2-10Hz的節律性自發放電。標尺:20μm。


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